1型糖尿病（T1D）是一種自身免疫性疾病，其特征是胰島中效應(yīng)T細(xì)胞的過度激活會清除自身的胰島β細(xì)胞，最終導(dǎo)致胰島素的嚴(yán)重不足。目前，胰島素是唯一獲準(zhǔn)用于治療T1D的主要療法。盡管胰島素能夠維持患者的生命，但這種治療方式要求患者進(jìn)行規(guī)律的注射和長期的用藥，對患者及其家庭構(gòu)成了沉重的心理和經(jīng)濟(jì)壓力。

1型糖尿病存在的自身免疫問題仍然有待解決。既往的免疫治療方案受限于免疫抑制作用或者療效期短等問題。近期臨床試驗轉(zhuǎn)向一種新的治療方法——使用調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Tregs）來治療1型糖尿病。Treg細(xì)胞在抑制自身免疫反應(yīng)方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用，而這種抑制能力的下降與多種自身免疫疾病的發(fā)生緊密相關(guān)，T1D也在其中。被診斷為T1D的患者通常會出現(xiàn)Treg數(shù)量減少或功能缺失的現(xiàn)象。因此，Treg細(xì)胞也引發(fā)了科學(xué)家的興趣，他們正在進(jìn)行相應(yīng)的臨床試驗。

Treg療法在治療T1D方面仍處于起步階段。目前，Treg細(xì)胞的治療效果和特異性尚未完全滿足臨床應(yīng)用的高標(biāo)準(zhǔn)和安全性要求，因此還需要進(jìn)一步優(yōu)化。南達(dá)科他大學(xué)研究團(tuán)隊給Treg細(xì)胞表達(dá)了嵌合抗原受體（CAR），使其能識別來自胰島的內(nèi)分泌細(xì)胞（包括β，α，δ和PP細(xì)胞），抑制T細(xì)胞對胰島β細(xì)胞的損傷，從而解決了上述問題。這種CAR的核心是一個單鏈可變片段（scFv），靶向內(nèi)分泌細(xì)胞的表面標(biāo)志物HPi2。研究團(tuán)隊使用了快序生物（Rapid Novor）的REmAb單克隆抗體從頭測序服務(wù)準(zhǔn)確地測定了抗HPi2抗體的可變區(qū)序列，進(jìn)而將這些序列應(yīng)用于HPi2-CAR scFv的設(shè)計中。

      不難看出團(tuán)隊使用的從頭測序技術(shù)給CAR T細(xì)胞療法帶來了極大地便利。蛋白從頭測序可以為CAR的設(shè)計、構(gòu)建和驗證提供支持，從而簡化了靶點的識別和篩選過程。該過程包括對靶點已知的抗體進(jìn)行測序，進(jìn)而利用所得的抗體序列來構(gòu)建CAR的鉸鏈區(qū)和抗原結(jié)合域。掌握了這些關(guān)鍵的序列信息后，就能對治療方案進(jìn)行深入的優(yōu)化，以期望達(dá)到更為理想的治療效果。

HPi2-CAR Treg的改造流程，使用Rapid Novor的REmAb服務(wù)對抗HPi2抗體進(jìn)行從頭測序。

關(guān)注點：

     1. 南達(dá)科他大學(xué)研究團(tuán)隊利用蛋白從頭測序技術(shù)獲得了抗HPi2抗體序列，用于HPi2-CAR的設(shè)計、構(gòu)建和驗證。

     2. 獲得完整的抗體序列為CAR的結(jié)構(gòu)組成和設(shè)計提供重要信息，這不僅有助于優(yōu)化治療方案，還能顯著加速細(xì)胞治療的研發(fā)進(jìn)程。

參考文獻(xiàn)：

Radichev IA, Yoon J, Scott DW, Griffin K, Savinov AY. Towards antigen-specific Tregs for type 1 diabetes: Construction and functional assessment of pancreatic endocrine marker, HPi2-based chimeric antigen receptor. Cell Immunol. 2020;358:104224. doi:10.1016/j.cellimm.2020.104224